上海恒遠報道:人ELISA試劑盒檢測關(guān)于特異性顯色
更新時間:2014-05-30 點擊次數(shù):1163
酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)自問世以來,以其敏感性高,特異性強,操作簡便、安全,開創(chuàng)了免疫學(xué)科研的新紀元在科研方面得到了廣泛的應(yīng)用。但是人ELISA試劑盒在它的研究、生產(chǎn)及使用中常常會碰到非特異性顯色問題,ELISA試劑盒特異性、檢驗標本中含酶標記物的干擾物,操作不當(dāng)?shù)纫蛩囟紩?dǎo)致這樣的結(jié)果。本文就在實驗過程中產(chǎn)生的一些原因及如何采取一些措施,消除非特異性顯色作以分析。
在ELISA中正確的洗滌是保證得到可重復(fù)結(jié)果的關(guān)健一步,應(yīng)引起操作者重視。無論是手工操作還是機器操作,得出不正確的結(jié)果常與不正確的洗滌有關(guān),ELISA就是靠洗滌來達到分離游離和結(jié)合的酶標記物的目的。通過洗滌以消除殘留在板孔中沒能與固體抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
每種試劑都有其*反應(yīng)模式,其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應(yīng)時間長,會造成整板本底高,陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴,人ELISA試劑盒反應(yīng)板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋。