ELISA試劑標(biāo)本的收集和保存方法
一、尿液標(biāo)本
ELISA試劑同血標(biāo)本一樣,尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來說晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標(biāo)本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細(xì)胞,上皮細(xì)胞,管形)相對集中便于觀察。隨機(jī)尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運(yùn)動、藥物影響較甚,易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時(shí)收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性,檢出較輕微的病變。12小時(shí)尿細(xì)胞計(jì)數(shù)即Addis計(jì)數(shù)(前晚8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液),因時(shí)間較長,細(xì)菌易繁殖,須加入防腐劑甲醛。24小時(shí)尿(*天晨8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量,包括蛋白,糖,尿17-酮、17-羥類固醇,兒茶酚胺,Ca2+等,檢測不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細(xì)菌培養(yǎng),要求無菌,沖洗外陰后留取標(biāo)本。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量,zui少12 ml,50 ml,定時(shí)尿須全部收集,對女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標(biāo)本。
二、血液標(biāo)本
有些生理因素,如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,以條件一致為宜,如無法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素。
1.外周血
一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測(如白細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類等)受生理因素影響波動過大,比較時(shí)宜使條件盡量一致。涉及到體內(nèi)出、凝血功能的檢測項(xiàng)目(如血小板計(jì)數(shù),出血時(shí)間或凝血時(shí)間等)的檢測,一定要注意了解患者是否用過抗凝、促凝藥物,以便在減少或避免干擾因素的影響。
2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測等項(xiàng)目需采用抗凝靜脈血血漿外,目前絕大多數(shù)檢測項(xiàng)目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項(xiàng)目中,ELISA試劑有些(如血糖,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜;有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),0~4℃貯存活性減弱也不一,這些項(xiàng)目的檢測必須及時(shí)而快速;有些(如肌酸激酶等)受運(yùn)動等因素影響較大。抽血時(shí)避免溶血的發(fā)生也十分重要,尤其涉及血鉀,LDH等的測定。
三、糞便標(biāo)本
糞便標(biāo)本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價(jià)值。采集時(shí)要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計(jì)數(shù)應(yīng)收集24小時(shí)糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查,從有膿血和稀軟處取材,保溫送檢。查日本血吸蟲蟲卵時(shí)應(yīng)取粘液、膿血部分,孵化毛蚴時(shí)至少留取30g糞便,且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時(shí)或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(yàn)(化學(xué)法),試驗(yàn)前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑,維生素C等。所有糞便標(biāo)本采集后1小時(shí)內(nèi)應(yīng)檢查完畢,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞。
四、腦脊液標(biāo)本
腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢,放置過久將影響檢驗(yàn)結(jié)果:如細(xì)胞變性,破壞,導(dǎo)致計(jì)數(shù)和分類不準(zhǔn);有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少;細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個(gè)無菌管,*管作細(xì)菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管的順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難,全部送檢和檢測過程應(yīng)注意安全。
五、胸腹水標(biāo)本
ELISA試劑與腦脊液標(biāo)本一樣,采集后的標(biāo)本注意安全,及時(shí)送檢。一般也分裝三管,一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查,一管生化檢查,一管細(xì)菌培養(yǎng),順序以與腦脊液相同為宜。