我們有不少客戶在養(yǎng)細(xì)胞需要用到血清,可是不知道下面這些關(guān)于飼養(yǎng)細(xì)胞需要的血清的知識是不是每位客戶都知道。對于初學(xué)者本章內(nèi)容更是受益匪淺。我司技術(shù)詳細(xì)整理血清方面的知識供大家一起分享。
◆采血
胎牛血清采用心臟穿刺的方法采血。馬血清采自供體動物。新生牛血清采
自出生10至14天的小牛。全部按照工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)采血。
◆處理
全部血清:收集的血液均在冷藏條件下處理。血清和凝塊分離后立即將血清合并
并冷凍。只有符合伯血清才被接受作進(jìn)一步處理。
熱滅活血清:熱滅活是在56℃水浴中嚴(yán)格控溫30分鐘
超低1gG胎牛血清:GIBCO持有從血清中通過層析方法去除G球蛋白的。經(jīng)過這種程序處理的血清只有極低的1gG濃度(小于5mg/ml),但保持了血清的全部生物學(xué)活性。
透析血清:用12,000~14,000截留分子量的透析膜對0.15M的NaCl進(jìn)行透析直到葡萄糖水平低于5mg/md(用葡萄糖氧化酶/過氧化物酶方法檢測。)為防止沉淀和血清中多肽的滅活,不進(jìn)行過度的透析,因此一些小分子量的可透析成分如氨基酸不一定*去除。
伽馬射線照射血清:通過伽馬射線照射以滅活各種動物血清中的病毒和支原體的方法已經(jīng)得到證實(shí)。研究證實(shí)照射劑量在30-45KGy為宜。這一數(shù)據(jù)符合的歐洲和美國FDA的標(biāo)準(zhǔn),證實(shí)血清被照射后物理化學(xué)特性和細(xì)胞培養(yǎng)表現(xiàn)沒有改變。
◆保存和解凍血清
血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放于4℃不可超過一個月。解凍血清時,應(yīng)先將血清置于2-8℃冰箱,并經(jīng)常均勻使之溶解,然后在室溫放置使之升溫,絕不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會增加。血清在解凍或熱滅活后,應(yīng)按使用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。