原理
鱟是一種海洋節(jié)肢動(dòng)物,血液中含有一種變形細(xì)胞,此細(xì)胞的裂解物可與微量細(xì)菌內(nèi)毒素起凝膠反應(yīng),即細(xì)胞裂解物中的一種酶被內(nèi)毒素激活,使細(xì)胞裂解物中蛋白質(zhì)形成凝膠。鱟試驗(yàn)具有快速、簡(jiǎn)便、靈敏等優(yōu)點(diǎn)。
材料與儀器
鱟試劑
生理鹽水 無(wú)菌水 內(nèi)毒素
安瓶 習(xí)慣 水浴箱
步驟
一、材料
1. 鱟試劑(即裝于安瓶?jī)?nèi)的鱟變形細(xì)胞裂解物的凍干制品)。
2. 待測(cè)物(血液、細(xì)菌培養(yǎng)上清液或注射劑等)。
3. 標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素(大腸桿菌內(nèi)毒素含量100 ng/ml)、無(wú)熱原生理鹽水、無(wú)菌蒸餾水。
4. 1 ml無(wú)菌吸管、37℃水浴箱等。
二、方法
1. 打開(kāi)3支鱟試劑安瓶,各加0.1 ml無(wú)菌蒸餾水使之溶解,同時(shí)編號(hào)①、②、③。
2. 向①、②、③安瓶中分別加待測(cè)物、標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素、無(wú)熱原生理鹽水各0.1 ml。
3. 輕輕搖勻后,垂直放37℃水浴,15~30 min后取出觀察有無(wú)凝固。
三、結(jié)果觀察
十十 形成牢固凝膠,倒持安瓶凝膠不動(dòng)。
十 形成凝膠,但不牢固,倒持安瓶凝膠能動(dòng)。
- 不形成凝膠。
凡結(jié)果陽(yáng)性者表示內(nèi)毒素陽(yáng)性,本實(shí)驗(yàn)②為陽(yáng)性對(duì)照,③為陰性對(duì)照。