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技術(shù)文章

Technical articles

2023
5-22

ELISA技術(shù)綜述（三）
以下簡述固相載體和包被過程。1.2包被的方式將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用力。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，...
2023
5-15

ELISA技術(shù)綜述（二）
ELISA的商品化試劑盒成分和分類：在臨床檢驗或者科研檢測中，ELISA實驗通常有商品試劑盒提供。ELISA試劑盒中有三個必要的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；（3）酶的底物；（4）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測定中）；（5）酶聯(lián)物（結(jié)合物）及標(biāo)本的稀釋液；（6）洗滌液；（7）酶反應(yīng)終止液。1、免疫吸附劑已包被抗原...
2023
5-8

ELISA技術(shù)綜述（一）
ELISA原理ELISA利用抗原抗體之間專一性結(jié)合之特性，對標(biāo)本進(jìn)行檢測；由于結(jié)合與固體承載物（一般為塑膠孔盤）上之抗原或抗體仍可具有免疫活性，因此設(shè)計其結(jié)合機(jī)制後，配合酵素顯色反應(yīng)，即可顯示特定抗原或抗體是否存在，并可利用顯色之深淺進(jìn)行定量分析。根據(jù)待測樣品與結(jié)合機(jī)制的不同，ELISA可設(shè)計出各種不同類型的檢測方式，主要以"三明治法"(sandwich)、"間接法"(indirect)、以及"競爭法"(Competitive)三種為主，以下為各種方法之介紹。ELISA分類見...
2023
5-4

ELISA試劑盒中的抗體
在ELISA試劑盒中運用的抗體可分為多克隆抗體（多抗）和單克隆抗體（單抗）。多抗取白免疫動物的抗血清，制備較簡略，但抗血清成分凌亂，除含針對抗原（多個表位）的抗體外，還含有多種其他抗體，親和力和特異性相對要低于單抗，且制備周期長，批間差異較大。而單抗僅針對抗體的單一表位，ELISA試劑盒親和力和特異性均較多抗高，且制備技能老練，產(chǎn)量大，批間差異小，但結(jié)合位點的單一也正是其缺陷之地址，在雙抗體夾心法中，如包被和指示抗體運用同一單抗，則由于結(jié)合位點的短少，簡略構(gòu)成假陰．性成果。在...
2023
4-24

植物微囊藻毒素LR(MC-LR)elisa試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T1.2pg/mL-40pg/mL使用目的：本試劑盒用于測定植物組織，細(xì)胞及其它相關(guān)樣本中微囊藻毒素LR(MC-LR)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中植物微囊藻毒素LR(MC-LR)水平。用純化的植物微囊藻毒素LR(MC-LR)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入植物微囊藻毒素LR(MC-LR)，再與HRP標(biāo)記的微囊藻毒素LR(MC-LR)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過che底洗滌后加底物...
2023
4-19

ELISA中分析非特異性顯色
酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)自1971年自問世以來，以其敏感性高，特異性強(qiáng)，操作簡便、安全，而廣泛應(yīng)用于臨床診斷，開創(chuàng)了免疫學(xué)診斷的新紀(jì)元。但同其它免疫診斷方法一樣酶免試劑在它的研究、生產(chǎn)及使用中常常會碰到非特異性問題。1、試劑盒特異性因素1、1固相載體的選擇。ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種，以微量滴定板最為常見[1]。它具有良好的吸附性能，孔底透明度高，空白值低，各板之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別...
2023
4-10

ELISA試劑盒變質(zhì)原因詳解
ELISA試劑盒為什么會變質(zhì)？是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保？一旦變質(zhì)會有什么影響呢？一、辦法學(xué)的影響ELISA測定形式包含以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其間競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等選用)因受操作時差所引起的競爭等要素的影響，成果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難操控。二、試劑要素不同批次的ELISA試劑在制作進(jìn)程中很難保證質(zhì)量wan全一致，即使是通過批批檢的項目其檢測成果也存在差異，因而必須挑選和訂購長批號的試劑，并保證保存條件...
2023
4-3

人組蛋白H3賴氨酸27(H3K27me3)ELSIA試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T6pg/ml-220pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中組蛋白H3賴氨酸27(H3K27me3)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人組蛋白H3賴氨酸27(H3K27me3)水平。用純化的人組蛋白H3賴氨酸27(H3K27me3)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入組蛋白H3賴氨酸27(H3K27me3)，再與HRP標(biāo)記的組蛋白H3賴氨酸27(H3K27me3)抗體結(jié)合，形成抗體...

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